鸡蛋专用柱 FaVEx-NM-Egg SPE柱分析鸡蛋中多种兽药残留
 
现行兽药残留检验由于药物种类多及化学特性差异大，针对禽畜产品检验时需将药剂分类以多种方法分别进行检测，惟每个方法需要较繁复步骤及较多溶剂用量，同一样品为求检验时效则无法针对太多项目进行检测，致无法提升检验密度，只能选择重点药项进行监控；又基于样品本身基质特性差异，前处理方法于各类样品基质的适用性为一大挑战。
 
当今较普遍的前处理方法为固相萃取法（SPE柱法），处理一批样品至少需数小时且需使用大量溶剂冲堤净化；另有不少学者采用QuEChERs法进行前处理，亦有很好的结果可供参考。
 
巨研科技公司以高效能绿色前处理技术为目标，研发出一种应用于食品中兽药残留检验的快速萃取前处理技术—FaVEx（Fast Veterinary Extraction），为快速的兽药残留检验前处理技术，此技术结合了一支净化管（SPE柱）加上简化的萃取步骤，达到节省时间与溶剂用量、操作简单及再现性佳之效果，并基于鸡蛋样品的特性，发展出FaVEx-NM-Egg快速萃取净化套组應用於鸡蛋基质中多重兽药残留量分析 。
 
本研究以FaVEx-NM-Egg SPE柱（一步通过法获取目标物）分析鸡蛋样品中多种兽药，与传统兽药残留前处理技术相比，样品前处理整体效率可提高10倍以上，因操作更简单，不须精密设备辅助，人力成本减少90%，有机溶剂的使用减少约90%，同时减少了废弃物的产生。
 
此方法适用于鸡蛋、蛋粉等鸡蛋产品。
 
本篇搭配Agilent 6470液相色谱-三重四极杆质谱联用仪，同时检测添加浓度为5.0 ng/g、12.5 ng/g之鸡蛋样品中离子型抗球虫药等102项兽药残留，本篇定量极限可达5 ng/g，为快速、稳定之检验方法。
 
分析结果如表所示，除Florfenicol（氟苯尼考）及lasalocid A（拉沙里菌素A）之外，其余100项药项回收率均在50~120%范围内，变异系数（CV）介于0.1~21.6之间。
 
Item Compound Name 中文名称  
 
1 5-Hydroxythiabendazole 5-羟基噻苯达唑  
2 Albendazole 阿苯达唑  
3 Albendazole-Sulfone 阿苯达唑砜  
4 Albendazole-Sulfoxide 阿苯达唑亚砜  
5 Amino albendazole sulfone 阿苯达唑氨基砜  
6 Amprolium 氨丙啉  
7 Azaperol 氮哌醇  
8 Azaperone 氮哌酮  
9 Carazolol 卡拉洛尔  
10 Carbadox 卡巴氧  
11 Chloramphenicol 氯霉素  
12 Ciprofloxacin 环丙沙星  
13 Clarithromycin 克拉霉素  
14 Clindamycin 克林霉素  
15 Clopidol 氯羟吡啶  
16 Cyromazine 灭蝇胺  
17 Danofloxacin 达氟沙星  
18 DCBX 脱氧卡巴氧  
19 Decoquinate 癸氧喹酯  
20 Diclazuril 地克株利  
21 Dicyclanil 环虫腈  
22 Difloxacin 双氟沙星  
23 Dimetridazole 地美硝唑  
24 Enrofloxacin 恩诺沙星  
25 Eprinomectin-Na 依普菌素  
26 Febantel 非班太尔  
27 fenbendazole 苯硫咪唑  
28 Fleroxacin 氟洛沙星  
29 Florfenicol amine 氟苯尼考胺  
30 Florfenicol 氟甲砜霉素  
31 Fluazuron 吡虫隆  
32 Flubendazole 氟苯咪唑  
33 Flumequine 氟甲喹  
34 Furaltadone 呋喃它酮  
35 Furazolidone 呋喃唑酮  
36 Halofuginone 卤夫酮  
37 Josamycin 交沙霉素  
38 Kitasamycin 吉他霉素  
39 lasalocid A 拉沙洛菌素  
40 Levamisole 左旋咪唑  
41 Lomefloxacin 洛美沙星  
42 Maduramycin 马杜霉素  
43 Marbofloxacin 马波沙星  
44 Mebendazole 甲苯咪唑  
45 Metronidazole 甲硝唑  
46 Monensin 莫能菌素  
47 Morantel 甲噻吩嘧啶  
48 Nalidixic acid 萘啶酮酸  
49 Narasin 那拉霉素  
50 Neospiramycin I 新螺旋霉素  
51 Nicarbazin 尼卡巴嗪  
52 Nitrovin 双呋脒腙  
53 Norfloxacin 诺氟沙星  
54 Novobiocin 新生霉素  
55 Ofloxacin 氟嗪酸  
56 Olaquindox 喹乙醇  
57 Oleandomycin 竹桃霉素  
58 Orbifloxacin 奥比沙星  
59 Ormetoprim 奥美普林  
60 Oxfendazole-Sulfone 磺唑氨酯  
61 Oxolinic acid 恶喹酸  
62 Pefloxacin 培氟沙星  
63 Pipemidic acid 吡哌酸  
64 Piromidic acid 吡咯酸  
65 Pyrimethamine 乙胺嘧啶  
66 Robenidine 氯苯胍  
67 Ronidazole 罗硝唑  
68 Salinomycin 沙利霉素  
69 Sarafloxacin 沙拉沙星  
70 Spiramycin I 螺旋霉素 I  
71 Succinylsulfathizole 琥珀酰磺胺噻唑  
72 Sulfabenzamide 磺胺苯酰  
73 Sulfacetamide 磺胺醋酰  
74 Sulfachlorpyridazine 磺胺氯哒嗪  
75 Sulfaclozine 磺胺氯吡嗪  
76 Sulfadiazine 磺胺嘧啶  
77 Sulfadimethoxine 磺胺二甲氧嘧啶  
78 Sulfadoxine 磺胺多辛  
79 Sulfaethoxypyridazine 磺胺乙氧化吡嗪  
80 Sulfaguanidine 磺胺脒  
81 Sulfamerazine 磺胺甲基嘧啶  
82 Sulfameter 磺胺对甲氧嘧啶  
83 Sulfamethazine 磺胺二甲基嘧啶  
84 Sulfamethizole 磺胺甲二唑  
85 Sulfamethoxazole 磺胺甲基异恶唑  
86 Sulfamethoxypyridazine 磺胺甲氧嗪  
87 Sulfamonomethoxine 磺胺间甲氧嘧啶  
88 Sulfapyridine 磺胺吡啶  
89 Sulfaquinoxaline 磺胺喹恶啉  
90 Sulfathiazole 磺胺噻唑  
91 Sulfatroxazole 磺胺曲沙唑  
92 Sulfisomidine 磺胺二甲异嘧啶  
93 Sulfisoxazole 磺胺异恶唑  
94 Tetramisole 四咪唑  
95 Thiabendazole 噻苯唑  
96 Thiamphenicol 甲砜霉素  
97 Tiamulin 泰妙菌素  
98 Tilmicosin 替米考星  
99 Trichlorfon 敌百虫  
100 Trimethoprim 甲氧苄啶  
101 Tylosin 泰乐菌素  
102 Virginiamycin M1 维吉尼亚霉素M1  
 

(一) 样品制备流程 

1.1 耗材与试剂
1%醋酸乙腈、无水硫酸钠、高速振荡机、离心机、FaVEx-NM-egg SPE柱、手压或正压压柱机、浓缩仪、0.22um的滤膜。
 
1.2 前处理操作步骤
 
1.3 注意事项
  1. FaVEx-NM-egg SPE柱需要与10mL的一次性塑料注射器配合使用。
  2. 正压净化*：搭配正压压柱机使用，批量压柱6只FaVEx-NM-egg净化柱。
  3. *回溶液：甲醇/水 ( V / V = 6 / 4 )溶液。                                                                                                             
  4. **待测物LOQ要求较低时，可取滤液浓缩2-10倍；浓缩倍率：取5mL滤液，浓缩至近干后以500µL的回溶液回溶)。
  5. 推荐使用HPPE-48高通量真空加热振荡浓缩仪，快速自动浓缩到近干，不放通风橱也没有异味，或氮吹浓缩仪等同等功能的浓缩设备。      

 

(二) 液相层析参考条件 

移动相流速：0.3 mL/min
层析管柱：ZORBAX RRHD Eclipse Plus C18 内径3.0 × 150mm 1.8-Micron
流动相溶液-A液：水+0.1%甲酸
流动相溶液-B液：甲醇+0.1%甲酸
流动相溶液：A液与B液以下列条件进行梯度分析
分析仪器：1290/6470液相色谱-三重四极杆质谱联用仪(Agilent)
*回溶液：甲醇/水( V / V = 6 / 4 )溶液
时间(min) A(%) B(%)
0.0 98 2
2.5 95 5
3.5 80 20
6.0 75 25
8.0 70 30
11.5 50 50
13.0 30 70
14.0 10 90
14.5 5 95
20.0 5 95
24.0 98 2
post time：4.0 min
表一、兽药102项药剂之多重反应侦测模式参数

 
图一、鸡蛋样品之102项多重兽药LC/MS/MS-MRM图谱（添加样品浓度为5.0 ng/g）
 
图二、鸡蛋样品之102项多重兽药LC/MS/MS-MRM图谱（添加样品浓度为12.5 ng/g）

表二、以FaVEx-NM-Egg净化鸡蛋样品萃取液之多重兽药102项药剂之回收率和变异系数(欢迎与我们联络索取) 　　
（添加5.0 ng/g、12.5 ng/g于鸡蛋样品）

(三) 结论

本研究以FaVEx-NM-Egg SPE柱分析鸡蛋样品中多种兽药，与传统兽药残留前处理技术相比，样品前处理整体效率可提高10倍以上，因操作更简单，不须精密设备辅助，人力成本减少90%，有机溶剂的使用减少约90%，同时亦减少了废弃物的产生。
 
鸡蛋基于本身基质特性与一般禽畜肌肉类样品差异较大，FaVEx-NM-Egg SPE柱针对鸡蛋类样品提供更好的净化及萃取效果，此方法适用于鸡蛋、蛋粉等鸡蛋产品。
 
本篇搭配Agilent 6470液相色谱-三重四极杆质谱联用仪，同时检测添加浓度为5.0 ng/g、12.5 ng/g之鸡蛋样品中离子型抗球虫药等102项兽药残留（项目列表详见表）。 分析结果除Florfenicol（氟苯尼考）及lasalocid A之外，其余100项药项回收率均在50~120%范围内，变异系数介于0.1~21.6之间。本篇定量极限可达5 ng/g，为快速、稳定之检验方法。
 
另有FaVEx-NM-egg净化鸡蛋基质，检测多种农药的药剂清单，欢迎联络询问。